用于分子生物學研究的樣本主要為RNA和DNA,其中RNA需要比DNA更嚴格的貯存條件,主要原因是RNA非常不穩(wěn)定,而催化RNA降解的RNase非常穩(wěn)定又無處不在。目前,有許多商業(yè)的RNA樣本儲存管和試劑可供選擇,以幫助科研工作者儲存和運輸RNA樣本。下面,小編就為大家介紹幾種最常用的RNA樣本儲存試劑,希望能對大家的樣本收集和儲存工作有所幫助。
(一)RNAlater液態(tài)組織保存試劑
RNAlater是一種液態(tài)、無毒的組織保存試劑。它能迅速滲入新鮮組織,保護非冷凍細胞RNA于原位。使用時注意:1)RNAlater應室溫保存,保質期6個月。如放置在4℃或冷凍條件下則會引起沉淀,此時需加熱到37℃才可澄清。2)RNAlater可廣泛應用于各類新鮮組織,包括腦、心、腎、脾、肝、睪丸、骨骼肌、脂肪、肺和胸腺等。3)組織放置入RNAlater前,切勿凍存!
操作步驟:
(二)PAXgene?血液 RNA 試管
PAXgene?血液RNA管內含穩(wěn)定體內基因轉錄性狀的添加劑,可以快速的保護細胞內的RNA不被降解。該管可常溫保存3天,2-8度保存5天,-20℃或-70℃保存8年。
(圖片來往于BD公司的產品介紹文件)
操作步驟:
(三)Trizol / Trizol LS
Trizol 適用于從組織和細胞中提取總RNA, DNA和蛋白。每1 ml試劑可用于100mg組織或10 7 個細胞的總RNA提取,室溫保存,性價比最高。TRIzol LS Reagent是一種專門用于從液體樣本(如細菌、病毒、酵母、血液、組織懸液)中提取高質量RNA的試劑。與TRIzol Reagent相比,唯一區(qū)別在于其組分濃度,TRIzol LS Reagent 是一種用于提取液體樣本RNA的濃縮試劑,故提取相同量樣本所需的用量相對較少。TRIzol LS Reagent能夠充分裂解細胞,溶解細胞內含物,高效抑制RNA酶活性,從而可保持RNA的完整性。
操作步驟:
通過上述的介紹,大家會發(fā)現一種生物標本可能有好幾種RNA保存方法,那么,到底應該選擇哪一種方法最佳呢?
不要著急,
小編依據公司多年的項目經驗,
為您整理了多種類型樣本的RNA保存和運輸方法,
方便您的查閱。